Con el propósito de mejorar la producción enzimática de biodiesel, se evaluó el reuso de un inmovilizado de Candida antarctica lipasa B (CALB) bajo diferentes condiciones de reacción. Las mejoras incluyen: (1) reusar CALB en presencia de etanol (EtOH), (2) reusar de CALB en presencia de metanol (MeOH), (3) mezclas de alcoholes a diferentes relaciones molares (0:100, 20:80, 40:60, 50:50, 60:40, 80:20 y 100:0, %EtOH:%MeOH) y (4) empleo de materias primas de segunda generación: aceite de fritura (WCO) y aceite de higuerilla (CO). Cuando la primera estrategia se llevo a cabo el contenido de FAEE (esteres etílicos de ácidos grasos) alcanzado fue de 96% en el primer ciclo y después de cuatro ciclos disminuyó a 32%. Para la segunda estrategia el contenido de FAME (esteres metílicos de ácidos grasos) alcanzado fue de 63% en el primer ciclo y después de cuatro ciclos disminuyó a 13.5%. cuando se emplearon mezclas de alcoholes, el efecto negativo del MeOH fue evidente a medida que su concentración aumentaba independientemente del tipo de aceite empleado.